如何又快又好地检测细菌病原
1、待检测的样品只需简单的研磨处理，加入试剂盒内提供的试剂，经过两步反应就可肉眼观察结果，不需特殊的仪器。根据试剂盒说明书上规定的操作步骤，可在一天内完成特定病原的检测。
2、传统检测有三种方法直接显微镜观察，正常情况，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度以及培养时间），同种微生物表现出稳定的菌落特征。可以通过显微镜观察菌落特征对微生物种类进行判断。
3、\x0d\x0a7 Nested-PCR，两对引物巢式PCR。两对引物两次扩增，最大的优势是检测准确性、灵敏度可绝对保障，劣势是检测时间较长。
4、涂片镜检将病料涂于清洁无油污的载玻片上，干燥后在酒精灯火焰上固定，选用单染色法（如美蓝染色法）、革兰染色法、抗酸染色法或其他特殊染色法染色镜检，根据所观察到的细菌形态特征，作出初步诊断或确定进一步检验的步骤。
5、可能造成假阴性，假阳性，杂菌污染等，延误诊断，危及生命。对于严重感染，需要确定病原菌的，标本应该选择细菌可能定植的部位，如深部痰液，胸水，血液等，标本提取的时间应该在抗菌药物使用前，最好在发生寒战的时候。
6、标本的采集原则严格的无菌操作，适宜时机和适当的部位，在抗生素使用之前采集，采样后尽快送检查及做好标记。
如何从病料中提取细菌的DNA
dna的提取方法：浓盐法、SDS法、CTAB法等。 浓盐法。根据DNA和RNA在电解溶液中的溶解度不同，可将二者分离。
苯酚/氯仿/异戊醇抽提一次，氯仿抽提一次后，乙醇沉淀DNA，用自动移液器吸管头将絮状DNA沉淀块吸附到Ep管中，70%乙醇洗2次，干燥后溶于适当1×TE或ddH2O中。
水煮模板法——主要用于PCR反应 操作最简便，对试剂条件要求低。缺点是纯度不够高，可能会含有RNA、蛋白等杂质。但是作为一般检测目的的PCR反应模板已经足够了。
个人感觉成功概率不高大概10次中能p出7次吧。适合大批量pcr的时候用。如果直接煮不行，可以先用溶菌酶处理，再开水煮。如果还不行，那只能抽取了，我有个方法1h可以提取完，dna可以保存几年，你要是不行了，再问我。
用什么方法将两种混合菌进行分离纯化并鉴定
动物病原细菌分离鉴定投什么细菌鉴定的基本原则是通过细菌的形态结构、生长特性、抗原性、病原性以及目前流行的核酸测定方法等检测，并用已知标准免疫血清确定分离细菌的属、种和型。
菌核分离：茯苓、猪苓、雷丸等菌的子实体不易采集。而常见的是它贮藏营养的菌核。用菌核分离，同样可以获得菌种。方法是将菌核表面洗净，用酒精或升汞消毒后，切开菌核，取中间组织一小块，约黄豆大小，接种在PDA 培养基斜面上，保温培养。
纯化方法，一般有2种：平板划线单菌落分离法和单细胞分离法。前一种操作简便，效果良好，适用范围广。
菌种分离主要在培养皿上进行，常用的方法是稀释法和划线法。
大肠杆菌检测方法国标是用什么方法检测的
法律分析：大肠菌数指数：指每立升中大肠菌群数，采用乳糖发酵法检测。 中国卫生标准是每1000ml饮水中不得超过3个大肠菌群，瓶装汽水和果汁中每100ml大肠菌群不能超过5个。
（一）国家标准：国家标准采用三步法，即：乳糖发酵试验、分离培养和证实试验。乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。
大肠菌数指数：指每立升中大肠菌群数，采用乳糖发酵法检测。中国的卫生标准是每1000ml饮水中不得超过3个大肠菌群；瓶装汽水、果汁等每100ml大肠菌群不得超过5个。
GB 4783—2010《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》第一法：大肠菌群MPN 计数法。第二法：大肠菌群平板计数法。两种方法适用于各类食品中大肠菌群的计数。
发酵法 这种方法主要是在45℃下的培养基上进行大肠杆菌的培养，该培养基含有荧光底物，需要培养 24 h。然后对荧光底物进行释放，需要采用葡萄糖醛酸进行，让培养基能够在紫外光的照射下发出荧光。
（一）国家标准：国家标准采用三步法，即：乳糖发酵试验、分离培养和证实试验。（二）原国家商检局制订的行业标准，等效采用美国FDA的标准方法，用于对出口食品中的大肠杆菌进行检测。
